生物顯微鏡是一種利用斜射光照明觀察不透明物體立體形狀或表面結(jié)構(gòu)的顯微鏡，在生物學(xué)中可以用來觀察植物的根、莖、葉、花等器官及表層組織的形態(tài)和結(jié)構(gòu)，動物中的微小器官和各種組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。同時(shí)，在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和科學(xué)文化事業(yè)的許多領(lǐng)域內(nèi)也有著廣泛的用途。

要使顯微鏡能夠觀察立體像并不太困難，實(shí)際上把兩個功能獨(dú)立的叢微鏡使其光鈾以一定小的角度（一般12—14°）連接在一起就可以構(gòu)成“臺實(shí)體顯微鏡。比較原始類型的文體顯微鏡（圖12．4）就是如此，它具有兩套明確分離的物鏡、鏡簡和目鏡。當(dāng)然對于立體效果來說，兩個分離的鏡筒或兩個分離的物鏡并不一定是必需的。只要一個物鏡具有足夠大的孔徑能夠允許互成12一l4。角度的兩束光線進(jìn)入，那么使用—個物鏡和鑰筒就可以了，實(shí)際上大多數(shù)現(xiàn)代的實(shí)體顯微鏡都是單物鏡和單鏡簡類型的。

圖12．5是一臺WILDM3型實(shí)體顯微鏡。它有一個比較穩(wěn)同曲鏡座，鏡體被固定齊鏡柱上，物體的聚焦只通過一個粗調(diào)旋鈕而進(jìn)行，這對于使用較大約場保和較低的放大倍數(shù)觀察物體的立體結(jié)構(gòu)來說*夠用了。文體顯微鏡具行較大的自由工作距離，一般為8一12cm，這對于觀察各種樣品來說也*足夠了。在鏡座上有一個圓形的載物板，可以放置被觀察的樣品。——般載物板一面是白色的，另一面是黑色的，燈以根據(jù)所觀察樣品的顏色選用，以達(dá)到良好的反差效果。觀察使用雙目鏡筒時(shí)，兩個目鏡簡之間的距離可以根據(jù)觀察者兩眼瞳孔間的距離進(jìn)行調(diào)節(jié)。

生物顯微鏡總放大倍數(shù)的變換，雖然也可以通過更換物鏡而實(shí)現(xiàn)，僅達(dá)只是在比較原始類型的鏡臺中，例如在Grceenough型實(shí)體顯微鏡中具有一個滑動型的物鏡更換裝置，但是由于機(jī)械原因及物鏡的大孔徑，很少使用可轉(zhuǎn)動的物鏡轉(zhuǎn)換臺。在現(xiàn)代的生物顯微鏡中，放大倍數(shù)的改變是迥過——個可變焦的透鏡系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)的，關(guān)于這種可變焦透鏡系統(tǒng)的光學(xué)原理已經(jīng)在第四章中講述過了，它通過在一組透鏡系統(tǒng)巾改變中間透鏡的位置，來改變放大倍數(shù)的。這種中間透鏡位置的改變是通過調(diào)節(jié)放大倍數(shù)旋鉗來進(jìn)行的。在一般的生物顯微鏡中，具有6x、12x、25x、50x幾個放大倍數(shù)的選擇到度。所使用的常用目鏡有10x、15x、20x等幾種，這樣，生物顯微鏡的總放大倍數(shù)在60一1，ooox的范圍之內(nèi)。實(shí)際上對于立體現(xiàn)察來說，使用太高的放大倍數(shù)時(shí)由十場誅的減小，立體效果就會喪失，這種像就會變成物體的薄光學(xué)切面，其結(jié)果在深度上的差異（這對于立體現(xiàn)察來說是必需的）就不可能被辨認(rèn)，因此觀察標(biāo)本立體結(jié)構(gòu)只能使用較低的放大倍數(shù)。對于較大的標(biāo)本，如果60x的zui小總放大倍數(shù)仍然嫌大，可以再使用一個o．4x的附加物鏡，使總放大倍數(shù)減小到24x，而使物場的直徑由原來的；3．8mm可以增大到88．2mm。與此相反，還可以使用1．6x的附加物鏡，來進(jìn)一步增大總放大倍數(shù)。表14中列出了常用的目鏡和可變焦透鏡系統(tǒng)（以及附加物鏡）各種組合時(shí)的總放大倍數(shù)以及物場直徑。

在一般顯微鏡中形成的像同物體相比是倒立的，在生物顯微鏡中，這種例立像對于標(biāo)本的解創(chuàng)或移動操作來說是不太方便的，當(dāng)一個指針從左下方指著標(biāo)本時(shí)，在顯微鏡中觀察就像是指針來自右上方。為了解決這一問題，所有的實(shí)體顯微鏡都裝置了一套倒轉(zhuǎn)棱鏡，使形成的倒立像再次倒轉(zhuǎn)成一個直立像。這種像的例轉(zhuǎn)在一般顯微鏡中是不必要的，而且會引起光能的損失和成像質(zhì)量的降低。

圖12．6是一個Porro倒轉(zhuǎn)棱鏡的光路圖，從圖中可以看出，要使一個像發(fā)生倒轉(zhuǎn)只用一個單一曲棱鏡顯然是不夠的，必須使用具有相互間處于一定光學(xué)關(guān)系的4個反射表面的復(fù)合體，經(jīng)過4次反射使得原因中顛倒的“5”字又重新顛倒過來。這種Porro倒轉(zhuǎn)棱鏡用于較舊類型的實(shí)體顯微鏡中，這種棱鏡被裝置在鏡簡中間一個較大的盒子里（圖12．4），在現(xiàn)代實(shí)體顯微鏡中，一般使用Z一棱鏡，這種棱鏡占據(jù)較小的空間（圖12．5）。

生物顯微鏡一舶使用斜射光照明，一個（或兩個）照明器通過支架連接在顯微鏡筒上，照明器的位置高低、照射方向和斜射角度都可以隨意進(jìn)行調(diào)節(jié)，以便能夠得到的立體效果。照明器所用的燈泡一船為6V15W白熾燈。此外，實(shí)體顯微鎊還可以使用透射光照明，只要更換一個半透明的毛玻璃載物板，并把照明器插入鏡座內(nèi)，就可以觀察較薄或透明的生物標(biāo)本，也可以直接觀察組織切片。這樣，實(shí)體顯微鏡就可以起到低倍透射顯微鏡的作用。

生物顯微鏡還可以借助于一個專門的照相接筒安裝顯微照相裝置和自動曝光控制器，非常方便地進(jìn)行實(shí)體顯微照相。

生物顯微鏡在生物學(xué)中被廣泛地應(yīng)用于觀察和解副植物的根、莖、葉、花、果實(shí)等器官和各種表皮組織；觀察和解剖微小的動物或動物器官及組織。除此而外，在醫(yī)學(xué)中，特別是顯微外科中，實(shí)體顯微鏡已經(jīng)成為一種*的有效的手術(shù)工具。根據(jù)各種醫(yī)療診斷檢查和各種外科手術(shù)的需要，已經(jīng)制造出形形色色的醫(yī)用實(shí)體顯微鏡。圖12．7所示的就是一臺用于顯微外科的生物顯微鏡，由于許多外科手術(shù)（例如在中耳、頭顱深處的手術(shù)）需要在較大距離的空間內(nèi)進(jìn)行精細(xì)的操作，因而這種顯微鏡具有不低于20cm的很長的自由工作距離，這種手術(shù)顯微鎊具有大型的自由移動臺和內(nèi)裝的放大倍數(shù)變換器，鏡臺的調(diào)節(jié)、聚焦和放大倍數(shù)的轉(zhuǎn)換都可以通過腳踏控制器用腳來進(jìn)行操作，這樣能夠騰出外科醫(yī)生的兩只下進(jìn)行手術(shù)。另外，這種大型的鏡臺往往裝有附加的分光棱鏡，可以由兩個人進(jìn)行觀察和操作，還可以裝配照相裝置進(jìn)行拍照。

用于醫(yī)學(xué)的生物顯微鏡還有很多種類，例如眼科用實(shí)體顯微鏡，在這種儀器中一束狹窄的光通過眼球的透明部分，可以用來觀察眼球的“光學(xué)剖面”，進(jìn)行虹膜的移植手術(shù)。在婦科個使用一種低倍的入射照明實(shí)體顯微鏡，可以檢查子古內(nèi)的一定部位，用于子宮瘤的早期診斷。在皮膚病科及其他區(qū)學(xué)領(lǐng)域內(nèi)還使用毛細(xì)管顯微鏡，這是一種用落射光研究皮膚下脈管系統(tǒng)的生物顯微鏡，經(jīng)過—定的處理之后皮膚下的脈管系統(tǒng)就可以很清楚地被觀察到。

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