尼康顯微鏡-暗視野顯微鏡法

原理；暗視野顯微鏡與明視野顯微鏡的區(qū)別是光線照射的方法不同。暗視野顯微鏡有一個暗視野集光器（圖1—4），其中央有一個不適光的黑板遮擋，直射光線*不能進入物鏡，僅可從其邊緣射到載玻片的標(biāo)本上。因為光線不能直接進入鏡筒，所以視野背景是暗的。這樣就可在暗視野中看到明亮的物像。

材糯；1．菌種：變形桿菌、葡萄球菌幼齡（8—12小時）肉場培養(yǎng)物。

2．蓋玻片、薄載玻片（1.5mm以下）、暗視野集光器、虹彩光闌或持制泊鏡頭、強光燈。

方法；1．在普通光學(xué)顯微鏡上換裝暗視野集光器，使其頂面距載物臺o．5cm，并加一滴香柏油。

2．卸下油鏡頭，添加一虹彩光閑或換以附有縮放光聞的特制油鏡頭。

3．取2環(huán)菌液，放于載玻片上，加上蓋玻片。放在載物臺上，仔細上升集光器，使油滴與載玻片下表面接觸，嚴(yán)防油滴中有氣泡。

4．轉(zhuǎn)動反光鏡，使光線集中于暗視野集光器上．用低倍鏡觀察。當(dāng)視野中有一圓形光環(huán)出現(xiàn)時．轉(zhuǎn)動集光器上的調(diào)節(jié)器，將光環(huán)移于視野中心。

5．另加一滴香柏油于蓋玻片上，用泊鏡檢查。

結(jié)果；在黑暗的背景中能看發(fā)亮的茵體。

尼康顯微鏡-暗視野顯微鏡法

注意事項

1．集光器與載玻片之間一定要被香柏油充滿,否則照明光線會在集光器上面進行全面反射，從而得不到黑暗背景。

2．集光器的光袖與物鏡的光抽要嚴(yán)格碉在一直線上，使集光器焦點對準(zhǔn)標(biāo)本。

3.載破片和蓋玻片一定要薄，要潔凈。

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